产品货号：
WH0227
中文名称：
T4 DNA连接酶（3U/μl)
英文名称：
T4 DNA Ligase（3U/μl)
产品规格：
60U（Weiss)
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本酶在以ATP作辅酶的情况下，可以催化相邻DNA链的5′磷酸基团和3′羟基之间的连接反应。平末端和粘性末端均可，此酶也可以催化双链RNA与双链DNA连接，但不能催化单链核酸的连接。
产品组成：
储存条件：T4 DNA连接酶和10×T4 DNA ligase Buffer必须放置于-20℃保存，避免反复冻融，10×T4 DNA ligase Buffer建议分装使用
活性单位定义：
1个Weiss活性单位是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、20分钟内将1nmol[32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量。1个Weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20μl反应体系（50mM Tris-HCl,pH7.5),10 mM MgCl2,10mM DTT,1 mM ATP,25μg/ml BSA,0.12μM （300μg/ml)的5′DNA末端)中，在16℃、30分钟内50%连接HindIII酶切的Lambda DNA产物所需要的酶量。
使用示例：
1．先将10×T4 DNA ligase Buffer在冰上融化，并进行短暂的离心。
2.以10μl连接体系示例，在微量离心管中加入以下各种成分：
3.16℃连接过夜。
4.将3～5μl连接产物转化至100μl感受态细胞中。
注意事项：
1.载体DNA和连接片段的摩尔比：对于不同的载体和DNA片段，要取得成功的连接，应分别建立具有不同摩尔数比例的连接反应。在大多数情况下，DNA片段的摩尔数应控制在载体DNA摩尔数的3～10倍。
2.10×T4 DNA ligase Buffer中含ATP，为避免ATP的降解，建议解冻后的10×T4 DNA ligase Buffer分装成小包装并在-20℃保存。
3.平末端的载体与DNA片断连接时，应首先对载体进行去磷酸化，以防止载体自身环化。
注意：如果向连接反应体系中加入PEG可以促进钝末端的连接，但PEG可能导致cDNA片段克隆产物出现串联体并抑制包装反应。
相关搜索：T4 DNA连接酶（3U/μl)，T4 DNA Ligase（3U/μl)
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| T4 DNA连接酶 | 60U |
| 10×T4 DNA ligase Buffer | 30μl |
储存条件：T4 DNA连接酶和10×T4 DNA ligase Buffer必须放置于-20℃保存，避免反复冻融，10×T4 DNA ligase Buffer建议分装使用
活性单位定义：
1个Weiss活性单位是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、20分钟内将1nmol[32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量。1个Weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20μl反应体系（50mM Tris-HCl,pH7.5),10 mM MgCl2,10mM DTT,1 mM ATP,25μg/ml BSA,0.12μM （300μg/ml)的5′DNA末端)中，在16℃、30分钟内50%连接HindIII酶切的Lambda DNA产物所需要的酶量。
使用示例：
1．先将10×T4 DNA ligase Buffer在冰上融化，并进行短暂的离心。
2.以10μl连接体系示例，在微量离心管中加入以下各种成分：
| 成分 | 用量 |
| 目的DNA片段 | 约0.1pmol |
| 载体DNA | 约0.01pmol |
| 10×T4 DNA ligase Buffer | 1μl |
| T4 DNA Ligase | 0.5-1μl |
| 无菌去离子水 | 补足到10μl |
3.16℃连接过夜。
4.将3～5μl连接产物转化至100μl感受态细胞中。
注意事项：
1.载体DNA和连接片段的摩尔比：对于不同的载体和DNA片段，要取得成功的连接，应分别建立具有不同摩尔数比例的连接反应。在大多数情况下，DNA片段的摩尔数应控制在载体DNA摩尔数的3～10倍。
2.10×T4 DNA ligase Buffer中含ATP，为避免ATP的降解，建议解冻后的10×T4 DNA ligase Buffer分装成小包装并在-20℃保存。
3.平末端的载体与DNA片断连接时，应首先对载体进行去磷酸化，以防止载体自身环化。
注意：如果向连接反应体系中加入PEG可以促进钝末端的连接，但PEG可能导致cDNA片段克隆产物出现串联体并抑制包装反应。
相关搜索：T4 DNA连接酶（3U/μl)，T4 DNA Ligase（3U/μl)